RayBiotech抗体芯片在川崎病研究

RayBiotech抗体芯片在川崎病研究中的应用

川崎病生物标志物和机制研究

杂志名称:Circulationresearch（IF11.）

文献引用：

KoTM,KuoHC,ChangJS,etal.CXCL10/IP-10isaBiomarkerandMediatorforKawasakiDisease[J].Circulationresearch,,(5):-.

本实验所用产品：RayBiotechAAH-CYT-G8抗体芯片

（54个趋化和粘附相关细胞因子抗体芯片）

实验样品：血浆

研究背景:

川崎病（Kawasakidiseaes）又称皮肤粘膜淋巴结综合症（MCLS），是一种以全身血管炎变为主要病理的急性发热性出疹性小儿疾病。由于本病可发生严重心血管病变，引起人们重视，近年发病增多，川崎病已取代风湿热为我国小儿后天性心脏病的主要病因之一。目前认为川崎病是一种免疫介导的血管炎，目前对于KD的诊断非常的困难，本研究的目的是寻找一个生物标志物用于早期诊断。收集个小儿发烧且有KD临床特征的血浆样本，其中例确诊为KD。用抗体芯片筛查生物标志物，本论文分为3个阶段：发现、重复验证和盲法验证；在发现阶段，IL-17F,sCD40L,E-selectin,CCL23,CXCL10/IP-10在KD组显著上调，其中IP10的ROC分析结果显示IP-10对于诊断KD有很好的灵敏度和特异性。盲法验证也表明IP-10是KD的一个非常好的生物标志物。后续研究证明通过治疗后，KD病人的IP-10恢复正常水平，下游的IP-10受体以及CXCR3在KD病人的T细胞中被激活。IP-10可以作为KD的一个便利的诊断标志物，且对KD的发病机制研究提供重要线索。

研究思路

1芯片样品准备

KD病人血浆样品

非KD发热对照血浆样品

2RayBiotech抗体芯片筛查KD病人与对照血浆细胞因子差异

RayBiotech人细胞因子抗体芯片检测筛查KD病人与对照血浆细胞因子差异，结果发现IL-9,IP-10,E-selectin,MPIF-1四个细胞因子在KD病人血浆中表达量升高，加大样品数量采用RayBiotech的ELISA验证，发现IL-9随着样品数量增多显著性差异消失，而IP-10,E-selectin,MPIF-1仍然是在KD组显著性升高。

3IP-10的重复验证和ROC分析

在几个候选生物标志物中，IP-10的变化幅度最大且统计学差异最为显著。加多样品数量再次验证，且ROC分析IP-10作为KD诊断标志物，灵敏度%，特异性77%，线下面积AUC=0.94，具有非常好的判别效果。

4IP-10作为诊断标志物的盲测验证

盲法验证实验结果显示，IP-10cutoff值pg/mL可以很好的分辨23个KD病人和37个non-KD发热对照(sensitivity,96%[22/23];specificity,81%[30/37])。

5血浆IP-10水平与发热时间以及IVIG治疗前后的关系

IP-10cutoff值pg/mL，81%KD病人可以在早期(4days)被诊断出来,96%KD病人可以在急性期(5days)被诊断出来。在IVIG治疗后，44例病人的IP-10水平恢复正常水平，而只有1例病人的IP-10在第一次治疗后没有变化，需要第二次治疗。

6IP-10与KD的病理研究的关系

IP-10可以下调T细胞表面CXCR3，为检测KD病人血浆中上调的IP-10对下游的机制影响，分析KD病人T细胞表面的CXCR3的水平变化，KD病人CXCR3表达量比正常对照表达量增加3.3倍，说明IP-10可能激活CXCR3信号通路，对KD的发生和发展起到关键作用。

结论：RayBiotech芯片的筛查结果为KD寻找到非常重要且便利的血浆生物标志物IP-10，且为KD病理研究和治疗研究提供重要研究线索。

本文使用RayBiotechAAH-CYT-G8抗体膜芯片

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美国Raybiotech成立于年，是一家以蛋白芯片和酶免试剂盒为主要产品，集生物高科技产品研究、生产、销售于一体的高科技企业。公司拥有近页的产品目录，主要涉及蛋白质芯片、抗体芯片、全自动芯片工作站、芯片扫描仪、抗体、免疫试剂、诊断试剂等近万种。同时提供实验操作，结果提取，数据分析，论文撰写一条龙专业技术服务。通过采用我们的产品及服务，世界各地的研究人员成功地在Nature、NatureMedicine、Cell、PNAS、Lancet等世界顶级期刊上发表了高分文章。选择专业，成就伟业！